0 前言
油料種子的脂肪含量是決定其品質(zhì)的重要指標(biāo)之一, 也直接影響到油料的價格 。測定脂肪含量的方法很多, 其中最傳統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)測定方法是索氏抽提法,但該法操作費(fèi)時費(fèi)力, 不能滿足快速測定的要求。FAFA 比傳統(tǒng)的索氏抽提法更加快捷安全,經(jīng)濟(jì)可靠, 已成為糧油脂肪測定的一種重要工具。但該儀器在最主要的油料作物大豆的脂肪測定中, 測定方法很不統(tǒng)一, 因大豆的脂肪含量高,一些用戶為了追求結(jié)果的可靠 ,在操作中盲目延長抽提時間 ,使該儀器的潛能沒有充分發(fā)揮出來 。FAFA 在大豆脂肪測定中影響因素很多 , 如浸提溶劑 、浸提溶劑的體積、溫度、浸泡時間、抽提時間 、粉碎粒度等。該實驗使用的溶劑為石油醚(30 ℃～ 60 ℃), 加熱板溫度為135 ℃,浸提溶劑為 70 ～ 90mL ,這是由儀器本身的設(shè)計工藝所決定的 ,較高的加熱板溫度會提高溶劑回流速度,但溫度過高 ,溶劑容易暴沸 ,〗甚至有爆炸的危險,溶劑體積過多或過少也會直接影響回流效果,對于FAFA , 80mL 左右的溶劑量回流效果最佳。該文側(cè)重探討在FAFA 的使用中, 粉碎粒度 、浸泡時間 、抽提時間對大豆脂肪測定結(jié)果的影響。
1 材料與方法
1 .1 實驗材料
美國 2#大豆 ;黑龍江大豆。(樣品冷藏于 4 ℃冰箱中 ,現(xiàn)用現(xiàn)磨 。)
1 .2 儀器用具
Perten 3100 實 驗 磨:轉(zhuǎn) 速 16800r/min , 篩 網(wǎng)0 .8mm ;JFSD -100 粉碎機(jī) ;上海嘉定糧油檢測儀器廠; SZC-101上海纖檢自動脂肪測定儀 :瑞典福斯公司 ;分析天平:Mettler Toledo ME204 ,精度 0 .0001g ;索氏脂肪抽提器:上海纖檢儀器有限公司 ;電熱恒溫水浴鍋:天津中環(huán)實驗儀器有限公司;數(shù)顯式電熱恒溫干燥箱:上海陽光實驗儀器有限公司 ;
備有變色硅膠的干燥器 ;海爾冰箱。

1 .3 試劑石油醚(30 ℃～ 60 ℃),分析純 ,天津市天河化學(xué)試劑廠。
1 .4 測定方法
1 .4 .1 國標(biāo)法 大豆脂肪的測定方法按 GB/T14488 .1 -93 執(zhí)行 。
1 .4 .2 FAFA 法
1 .4 .2 .1 樣品制備 取除凈雜質(zhì)的樣品 30 ～ 50g ,粉碎后裝入廣口瓶中備用 。
1 .4 .2 .2 準(zhǔn)備浸提燒杯 將浸提杯放于 105 ℃烘箱中烘 1h , 取出, 置于干燥器中冷卻后稱量 , 精確至0 .001g 。
1 .4 .2 .3 樣品干燥 從備用樣品中 ,用濾紙筒稱取試樣 3 ～ 5g , 精確至 0 .001g 。放入 105 ℃ 烘箱干燥30min ,然后將濾紙筒安裝到 2050 脂肪測定儀上。
1 .4 .2 .4 儀器操作 將稱量好浸提燒杯通過杯支架放到浸提裝置上, 降下冷卻器的高度。用溶劑添加筒通過連接分配器向每個杯子中加入 80mL 石油醚(30 ℃～ 60 ℃)。打開冷凝水 , 在儀器控制裝置上設(shè)置好所需程序并按啟動鍵, 儀器按所需程序進(jìn)行浸泡 、抽提和溶劑回收。
1 .4 .2 .5 干燥 將浸提燒杯與提取物放入 105 ℃烘箱中 , 30min 后取出放入干燥器 ,冷卻稱重 。
1 .4 .2 .6 計算 脂肪(濕基)%=
(m2-m1)(100 -M標(biāo)水)×100/m(100 -M)
m2 —干燥后抽提物與浸提燒杯的質(zhì)量, g ;
m1 —浸提燒杯的質(zhì)量, g ;
m —試樣的質(zhì)量 , g;
M標(biāo)水 —標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定水分百分?jǐn)?shù), 即每百克樣品中含水分克數(shù) , g 。
M —每百克試樣中含水分克數(shù), g 。
1 .4 .3 結(jié)果處理 所有實驗做雙實驗 ,如雙實驗結(jié)果之差不超過 0 .4 %, 則取兩次測定的算術(shù)平均值為測定結(jié)果。如果雙實驗結(jié)果之差超過 0 .4 %, 則另取兩份試樣進(jìn)行測定。如測定結(jié)果仍超過0 .4 %,而前兩次測定平均值與后兩次測定值之差不超過0 .4 %,則取四次測定的平均值作為測定結(jié)果 。
1 .5 實驗步驟
1 .5 .1 按國標(biāo)法對兩種大豆樣品進(jìn)行脂肪測定, 并測定其水分含量 。
1 .5 .2 粉碎粒度的影響 將黑龍江大豆分別用Perten 3100 實驗?zāi)ァ⑸虾＜味?JFSD -100 粉碎機(jī)(1 .0mm篩網(wǎng)、1 .5mm 篩網(wǎng)、2 .0mm 篩網(wǎng))粉碎 , 粉碎后樣品裝入廣口瓶中 。用 FAFA 測定脂肪, 比較不同粉碎粒度對測定結(jié)果的影響。
1 .5 .3 不同浸泡時間與抽提時間(以下簡稱浸提)對測定結(jié)果的影響 大豆樣品經(jīng) Perten 3100 實驗?zāi)シ鬯楹? 用自動脂肪測定儀測定其不同浸提時間的脂肪含量,以確定最佳浸提時間 。實驗中 ,浸泡時間分別設(shè)定為 15min 、30min 、60min 、90min ;抽提時間分別設(shè)定為 30min 、60min 、90min 、120min 。浸泡時間為30min 時 , 另增加抽提時間為 45 min 、75 min 、105min 、180 min 、240 min 的脂肪測定實驗 ,以驗證實驗結(jié)果的可靠性。
2 結(jié)果與分析
2 .1 國標(biāo)法測大豆脂肪含量

2 .2 FAFA 法的影響因素
2 .2 .1 粉碎粒度的影響從表2 中可見 , Perten 3100 實驗?zāi)ケ?JFSD -100普通粉碎機(jī)制備的樣品浸提效果要好 。粒度的大小直接影響浸提的效果, 粒度越小 ,脂肪測定所需時間越短。粒度越大, 測定所需時間越長 ,結(jié)果也偏低。
2 .2 .2 浸泡時間對測定結(jié)果的影響從表 3 ～ 6 中可以看出, 浸泡時間的長短對測定結(jié)果的影響并不明顯, 浸泡的目的就是讓樣品中的油脂擴(kuò)散到溶劑中, 在抽提過程中 ,油脂就可以順利地從試樣中分離出來 。用SZC-101上海纖檢 自動脂肪測定儀測定大豆脂肪含量 ,浸泡時間為 30min 可以滿足實驗的要求,過多地延長浸泡時間沒有太多的意義 。
2 .2 .3 抽提時間對測定結(jié)果的影響表7 ～ 10 可以看出,抽提時間越長 ,樣品中油脂的提取越充分, 但隨著時間的延長 ,其影響會越來越小。因經(jīng)過一定時間的浸提, 樣品中的脂肪已經(jīng)被充分提取, 抽提時間達(dá)到 60min 以后時 ,測定結(jié)果基本不變。

3 討論
實驗表明 ,用 FAFA 測定大豆脂肪含量, 粒度越小 ,脂肪浸提越容易,因粒度小的物料有較大的有效表面積, 便于脂肪浸提 , Perten 3100 實驗?zāi)タ梢垣@得較小的粉碎粒度, 能夠滿足實驗要求 。
足夠長的浸提時間 ,可以得到與國標(biāo)法相同的結(jié)果 ,但在實際工作中, 在保證獲得準(zhǔn)確數(shù)據(jù)的同時 ,時間要越短越好。大豆樣品用 Perten 3100 實驗?zāi)シ鬯楹?, 用 FAFA 測定脂肪含量 , 用石油醚(30 ℃～ 60 ℃)做溶劑, 浸泡時間設(shè)置為30min ,抽提時間設(shè)置為 60min , 就可以取得與國標(biāo)法相同的結(jié)果。傳統(tǒng)的索氏抽提法測定大豆脂肪需 10h 以上時間, 而SZC-101上海纖檢自動脂肪測定儀進(jìn)行提取僅需 3h , 縮短了測定時間,提高了工作效率 。